病人的職業、工作和生活情況，如與牛、馬、羊等有頻繁接觸的農牧民、工作于帶芽胞塵埃環境中的皮毛革、皮革加工廠的工人等，對本病診斷有重要參考價值。皮膚炭疽具一定特征性，一般不難作出診斷。有關工廠工人發生呼吸道感染時，尤其當癥狀與體征不相稱時應提高警惕，需想到肺炭疽的可能。確診有賴于各種分泌物、排泄物、血、腦脊液等的涂片檢查和配養。涂片檢查最簡便，如找到典型而具莢膜的大桿菌，則診斷即可基本成立。熒光抗體染色、串珠濕片檢查、特異噬菌體試驗、動物接種等可進一步確立診斷。

皮膚炭疽須與癰、蜂窩織炎、恙蟲病的焦痂、兔熱病的潰瘍等相鑒別。肺炭疽需與各種肺炎、肺鼠疫相鑒別。腸炭疽需與急性菌痢及急腹癥相鑒別。腦膜炎型炭疽和敗血癥型炭疽應與各種腦膜炎、蛛網膜下腔出血和敗血癥相鑒別。